课时分层作业(十三)(建用：议时40分钟)题组一目的基因的筛选与获取1．DNA的复制需要引物，主要原因是()A．可加快DNA的复制速度B．引物可与DNA母链通过碱基互补配对结合C．引物的5′端有助于DNA聚合酶的延伸DNA链D．DNA聚合酶只能从3′端延伸DNA链D[DNA聚合不能从酶5′端开始合成DNA，而只能从3′端延伸DNA，因此，链DNA复制需要引物。当引物与DNA母通碱基互配合后链过补对结，DNA聚合就能从引物的酶3′端开始延伸DNA，链DNA的合成方向是从子总的链5′端向3′端延伸。]2．利用PCR技术从某种生物的基因组DNA中获取目的基因的前提是()A．有目的基因的DNA片段，作为模板进行复制B．有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成引物C．有足够的脱氧核苷酸作为原料D．加入足够数量的DNA连接酶进行指数式扩增B[利用PCR技从某种生物的基因术组DNA中取目的基因的前提是要获有一段已知目的基因的核苷酸序列以便合成引物。]3．金属硫蛋白(MT)是一类广泛存在的金属结合蛋白，某研究小组计划通过多聚酶链式反应(PCR)扩增获得目的基因，构建转基因工程菌，用于重金属废水的净化处理。PCR扩增过程示意图如下，请回答下列问题：(1)从高表达MT蛋白的生物组织中提取mRNA，通过________获得________用于PCR扩增。(2)设计一对与MT基因两端序列互补配对的引物(引物1和引物2)，为方便构建重组质粒，在引物中需要增加适当的___________位点。设计引物时需要避免引物之间形成________________，而造成引物自连。(3)图中步骤1代表________，步骤2代表退火，步骤3代表延伸，这三个步骤组成一轮循环。(4)如果PCR反应得不到任何扩增产物，则可以采取的改进措施有________(填序号：①升高退火温度②降低退火温度③重新设计引物)。[解析](1)目的基因的取：从高表达获MT蛋白的生物中提取组织mRNA，通逆得过转录获cDNA用于PCR增。扩(2)一与设计对MT基因两端序列互配的引物补对(引物1和引物2)，方便为基因与体相构建重粒，在引物中需要增加适当的限制性内切核酸的载连组质酶切割位点。了避免引物自，引物需要避免引物之形成碱基互配为连设计时间补。对(3)根据PCR的程可知，中步过图骤1性，步为变骤2退火，步为骤3延为伸，三个步成一循。这骤组轮环(4)如果PCR反得不到任何增物，可能的原因是退火温度高，或应扩产过者的引物不合适，不能与模板碱基配。因此可采取的改措施有降低退设计对进火温度、重新引物等。设计[答案](1)逆转录cDNA(2)限制性内切核酸酶碱基互补配对(3)变性(4)②③题组二基因表达载体的构建4．在基因工程的操作过程中，获得重组质粒不需要()①DNA连接酶②限制性内切核酸酶③RNA聚合酶④具有标记基因的质粒⑤目的基因⑥四种脱氧核苷酸A．③⑥B．②④C．①⑤D．①②④A[构建重粒，首先要用限制切割含有目的基因的组质时酶DNA片段和体，其次需要用载DNA接将目的基因与体接；连酶载连RNA聚合催化酶转录程，得重粒不需要过获组质时RNA聚合；得重粒，需要具有基酶获组质时标记因的粒作体；重粒是由目的基因与粒形成的；四种脱氧核苷酸是质为载组质质合成DNA的原料，得重粒不需要四种脱氧核苷酸。获组质]5．在基因表达载体的构建中，下列说法不正确的是()A．基因表达载体的构建方法不完全相同B．有了启动子才能驱动基因转录出mRNAC．终止子的作用是终止翻译过程D．基因表达载体的结构包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等C[因受体胞有植物、物、微生物之分，且目的基因入受体胞为细动导细的方法不同，因此，基因表达体的构建方法是不完全相同的，载A正确；启动子是一段有特殊构的结DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合和酶识别结合的部位，能基因出驱动转录mRNA，最得所需要的蛋白，终获质B正确；终止子的作用是使在所需要的地方停止，止密子的作用是使翻在所需转录终码译要的地方停止，C；基因表达体包括启子、止子、目的基因、错误载动终标记基因等，D正确。]6．CTB是霍乱弧菌产生的肠毒素(蛋白质)结构的一部分，可用作针对霍乱弧菌的疫苗。研究人员提取了控制CTB合成的基因(ctb)，构建基因表达载体(如图所示)，将其导入番茄，然后用转基因番茄饲喂试验小鼠，检测疫苗的有效性。请回答相关...