小学、初中、高中各种试卷真题知识归纳文案合同PPT等免费下载www.doc985.com热点微练23基因工程的操作程序（尖子生特训）（时间：10分钟）1.（2022·湖南长郡中学调研）新型冠状病毒的肆虐给人们带来了严重的影响，其疫苗的研发十分重要。下面是以复制缺陷型人5型腺病毒（DNA病毒）为载体的重组新型冠状病毒疫苗的简要研制思路：①获取与新型冠状病毒（RNA病毒）S蛋白（抗原）相关的DNA片段。②将上述DNA片段整合到复制缺陷型人5型腺病毒的DNA上（失去在人体细胞中繁殖能力的腺病毒），并使其正常表达（在宿主细胞中进行）。得到含有S蛋白的腺病毒，称为重组腺病毒，可作为疫苗。结合所学知识，回答以下问题：（1）根据研制思路，有人提出在获取S蛋白的相关DNA片段时，可通过分析S蛋白的氨基酸序列，推算出mRNA序列，继而得到相关DNA序列，然后用法合成DNA；也有人提出可提取新型冠状病毒的RNA，然后通过获得DNA，利用技术对相关序列进行快速大量扩增。经过这两种方法获得的DNA序列是否一定相同？（填“是”或“否”）。（2）通过检测重组腺病毒是否表达出，判断疫苗研制是否成功。检测方法如下：用放射性元素标记S蛋白的，然后与重组腺病毒进行，若出现杂交带，表明相关DNA已经整合到腺病毒的DNA上，并成功表达。（3）从免疫学角度看，重组腺病毒疫苗的免疫效果要优于重组蛋白疫苗（抗原蛋白），原因是___________________________________________________。答案（1）（人工）化学合成（反）逆转录PCR否（2）S蛋白抗体抗原—抗体杂交（3）重组腺病毒疫苗既能激发机体的体液免疫又能激发细胞免疫，而重组蛋白疫苗只能激发机体的体液免疫（合理即可）解析（1）根据S蛋白的氨基酸序列可以推算出相关的DNA序列，然后可以用化学合成的方法直接人工合成；由RNA经（反）逆转录和PCR技术也可以得到相关DNA，由于密码子的简并性，这两种方法获得的DNA序列不一定相同。（2）要检测重组腺病毒疫苗研制是否成功，可以直接检测在重组腺病毒中是否表达出S蛋白，即抗原。用放射性元素标记S蛋白的抗体，然后与重组腺病毒进行抗原—抗体杂交，若出现杂交带，表明目的基因已经整合到腺病毒的DNA上，并成功表达。（3）机体清除入侵病毒的过程依赖于体液免疫和细胞免疫的共同配合。重组腺病毒疫苗既能激发机体的体液免疫又能激发细胞免疫，而重组蛋白疫苗只能激发机体的体液免疫。小学、初中、高中各种试卷真题知识归纳文案合同PPT等免费下载www.doc985.com小学、初中、高中各种试卷真题知识归纳文案合同PPT等免费下载www.doc985.com2.（2021·山东潍坊一模）报告基因是指一类易于检测且实验材料本身不具备的基因。阿尔茨海默病（AD）是由淀粉样前体蛋白（APP）过量表达导致的神经系统退变性疾病，用增强型绿色荧光蛋白（EGFP）基因作为报告基因。将EGFP基因与APP基因融合，可方便、经济、快速地筛选出促进人APP基因mRNA降解的药物。研究表明，EGFP基因与APP基因融合后，虽能全部转录但仅可合成EGFP。EGFP基因与APP基因融合过程如图所示。（1）APP751、EGFP基因的cDNA是以其mRNA为模板经过程形成的。（2）据图分析，Klenow酶的作用是____________________________。切割pcDNA3.1质粒获得APP751基因时，研究人员没有选择直接用HindⅢ、XbaⅠ同时切割，而是历经①→②→③的复杂过程，原因是_________________________________________________________。（3）COS－7细胞是来源于非洲绿猴肾成纤维细胞，培养这类细胞时，为保证细胞生长，应在合成培养基中添加。答案（1）逆转录（2）将XbaⅠ切割获得的黏性末端催化产生平末端直接用HindⅢ、XbaⅠ同时切割，产物两端都是黏性末端，才能与被SmaⅠ与HindⅢ酶切的载体连接（3）血清等一些天然成分解析（1）以mRNA为模板获得cDNA的过程称为逆转录。（2）由图分析可得，①是用限制酶XbaⅠ来切割，得到两个黏性末端，而Klenow酶将XbaⅠ切割获得的黏性末端催化产生平末端，③是用限制酶HindⅢ切割，得到含黏性末端的目的基因，可与④切割后的C1质粒构建成基因表达载体。若直接用HindⅢ、XbaⅠ同时切割，产物两端都是黏性末端，而经过①→②→③可使目的基因两端...