小学、初中、高中各种试卷真题知识归纳文案合同PPT等免费下载www.doc985.com第6课时基因工程的基本工具和基本操作程序课标要求1.阐明DNA重组技术的实现需要利用限制性内切核酸酶、DNA连接酶和载体三种基本工具。2.阐明基因工程的基本操作程序主要包括目的基因的筛选与获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞和目的基因的检测与鉴定等步骤。3.按照实验操作步骤，进行DNA的粗提取与鉴定实验。4.利用聚合酶链式反应(PCR)扩增DNA片段并完成电泳鉴定，或运用软件进行虚拟PCR实验。考点一重组DNA技术的基本工具1．基因工程的概念别名重组DNA技术操作环境生物体外操作对象基因操作水平DNA分子水平结果创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品2.基因工程的诞生和发展(1)肺炎链球菌转化实验不仅证明DNA是遗传物质，还证明了DNA可在同种生物不同个体之间转移。(2)DNA双螺旋结构的提出和半保留复制的证明。(3)中心法则的确立。(4)遗传密码的破译。(5)基因转移载体和限制酶、DNA连接酶和逆转录酶的发现为DNA的切割、连接以及功能基因的获得创造了条件。(6)DNA体外重组的实现。(7)重组DNA表达实验的成功。(8)DNA测序和合成技术的发明。(9)PCR技术的发明。(10)基因组编辑技术可以实现对特定基因的定点插入、敲除或替换。3．重组DNA技术的基本工具(1)限制性内切核酸酶(也称“限制酶”)小学、初中、高中各种试卷真题知识归纳文案合同PPT等免费下载www.doc985.com小学、初中、高中各种试卷真题知识归纳文案合同PPT等免费下载www.doc985.com(2)DNA连接酶(3)载体(1)源于性必修选择3P71“旁思考栏”：①原核生物中存在限制酶的意是什？义么提示原核生物中限制酶的作用是切割外源DNA以保自身安全，防止外病原物的危害证来。②限制酶源于原核生物，什不能切割自己的来为么DNA分子？提示原核生物DNA分子中不存在酶的序列或序列已被修。该识别识别经饰(2)源于性必修选择3P72“旁思考栏”：DNA接酶和连DNA聚合酶不是(填“是”或“不是”)一回事。原因是①DNA接酶接的是连连两个DNA片段，而DNA聚合酶是把的单个核酸脱氧苷接到已有的连DNA片段上。②DNA聚合酶起作用需要以一时条DNA模板链为，而DNA接酶连不需要模板。延伸应用解限制酶的原图选择则小学、初中、高中各种试卷真题知识归纳文案合同PPT等免费下载www.doc985.com小学、初中、高中各种试卷真题知识归纳文案合同PPT等免费下载www.doc985.com(1)不破坏目的基因原：如甲中可则图选择PstⅠ，而不选择SmaⅠ。(2)保留基因、子、止子、制原点原：粒作体必具基因，所标记启动终复则质为载须备标记以所的限制酶量不要破坏些，如乙中不选择尽这结构图选择SmaⅠ。(3)确保出相同黏性末端原：通常切割目的基因相同的限制酶，如甲中现则选择与图PstⅠ；避免目的基因和粒自身化和意接，也可使用不同的限制酶切割目的基因和粒，为质环随连质如甲也可图选择PstⅠ和EcoRⅠ限制酶。两种构建基因表达载体时，需要选择合适的限制酶切割含有目的基因的DNA片段和载体。已知限制性内切核酸酶Ⅰ的识别序列和切点是，限制性内切核酸酶Ⅱ的识别序列和切点是，根据图示分析回答下列问题：(1)请用图示法写出限制性内切核酸酶Ⅰ和限制性内切核酸酶Ⅱ切割后形成黏性末端的过程。提示限制性切核酸酶内Ⅰ：限制性切核酸酶内Ⅱ：(2)切割图示中的目的基因和质粒应选用哪类限制酶？请说明理由。提示用限制酶Ⅱ切割目的基因，用限制酶Ⅰ切割粒。质限制酶Ⅰ的序列包含限制酶识别Ⅱ的序列，因此限制酶识别Ⅱ也可切割限制酶Ⅰ的位点，故使用限制酶Ⅱ，可在目的基因端同作切割，而切出时两时从“目的基因”，但若使用限制酶Ⅱ切割粒，同破坏粒中的质会时质两个“基因标记”，故只能使用限制酶Ⅰ切割粒。质小学、初中、高中各种试卷真题知识归纳文案合同PPT等免费下载www.doc985.com小学、初中、高中各种试卷真题知识归纳文案合同PPT等免费下载www.doc985.com1．下表为常用的限制性内切核酸酶(限制酶)及其识别序列和切割位点，由此推断，下列说法错误的是()限制酶名称识别序列和切割位点限制酶名称识别序列和切割位点BamHⅠG↓GATCCKpnⅠGGTAC↓CEcoRⅠC↓AATTCSau3AⅠ↓GATCHi...