小学、初中、高中各种试卷真题知识归纳文案合同PPT等免费下载www.doc985.com解密26基因工程高考考点考查内容三年高考探源考查频率基因工程的概念与操作工具分析1．掌握基因工程的概念与操作工具分析；2．熟知基因工程的操作步骤；3．理解基因工程的应用与蛋白质工程。2020山东卷·142020全国III卷·122018北京卷·52018全国Ⅱ卷·382018全国Ⅰ卷·382018江苏卷·322018海南·312017新课标I·382017新课标II·382017北京卷·5★★★★☆基因工程的操作步骤★★★★☆基因工程的应用与蛋白质工程★★★★☆核心考点一基因工程的概念与操作工具分析1．基因工程的概念基因工程的别名基因拼接技术或DNA重组技术操作环境生物体外操作对象基因操作水平DNA分子水平基本过程剪切→拼接→导入→表达结果（优点）定向改造生物性状，创造出人小学、初中、高中各种试卷真题知识归纳文案合同PPT等免费下载www.doc985.com类需要的基因产物或生物类型2．“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶）（1）识别序列的特点：呈现碱基互补对称。无论是奇数个碱基还是偶数个碱基，都可以找到一条中心轴线，如，以中心线为轴，两侧碱基互补对称；=====以=====为轴，两侧碱基互补对称。（2）切割后末端的种类（3）限制酶的选择技巧①根据目的基因两端的限制酶切割位点确定限制酶的种类a．应选择切割位点位于目的基因两端的限制酶，如图甲可选择PstⅠ。b．不能选择切割位点位于目的基因内部的限制酶，如图甲不能选择SmaⅠ。c．为避免目的基因和质粒的自身环化和随意连接，也可使用不同的限制酶切割目的基因和质粒，如图甲也可选择用PstⅠ和EcoRⅠ两种限制酶（但要确保质粒上也有这两种酶的切割位点）。②根据质粒的特点确定限制酶的种类小学、初中、高中各种试卷真题知识归纳文案合同PPT等免费下载www.doc985.coma．所选限制酶要与切割目的基因的限制酶一致，以确保产生相同的末端。b．质粒作为载体必须具备标记基因等，所以所选择的限制酶尽量不要破坏这些结构，如图乙中限制酶SmaⅠ会破坏标记基因；如果所选酶的切割位点不止一个，则切割重组后可能丢失某些片段，若丢失的片段含复制起点区，则切割重组后的片段进入受体细胞后不能自主复制。3．“分子缝合针”——DNA连接酶（1）作用：将限制酶切割下来的DNA片段拼接成DNA分子。（2）类型种类E·coliDNA连接酶T4DNA连接酶来源大肠杆菌T4噬菌体功能特性只能连接黏性末端可以连接黏性末端和平末端，但连接平末端之间的效率较低相同点都缝合磷酸二酯键，如图：4．载体（1）条件与目的条件目的稳定并能复制目的基因稳定存在且数量可扩大有一个至多个限制酶切割位点可携带多个或多种外源基因具有特殊的标记基因便于重组DNA的鉴定和选择（2）作用①作为运载工具，将目的基因导入宿主细胞内。②利用它在宿主细胞内对目的基因进行大量复制。5．DNA连接酶与限制酶的关系（1）限制酶和DNA连接酶的作用部位都是磷酸二酯键。（2）限制酶不切割自身DNA的原因是该原核生物中不存在该酶的识别序列或识别序列已经被修饰。（3）限制酶是一类酶，而不是一种酶。小学、初中、高中各种试卷真题知识归纳文案合同PPT等免费下载www.doc985.com（4）DNA连接酶起作用时不需要模板。6．限制酶、DNA连接酶、DNA聚合酶等相关酶的分析比较名称作用部位作用底物形成产物限制酶磷酸二酯键DNA分子带黏性末端或平末端的DNA片段DNA连接酶磷酸二酯键DNA片段重组DNA分子DNA聚合酶磷酸二酯键脱氧核苷酸子代DNA分子热稳定DNA聚合酶磷酸二酯键脱氧核苷酸子代DNA分子DNA（水解）酶磷酸二酯键DNA分子游离的脱氧核苷酸解旋酶碱基对间的氢键DNA分子脱氧核苷酸长链RNA聚合酶磷酸二酯键核糖核苷酸单链RNA分子考法一（2020·浙江高考真题）下列关于基因工程的叙述，正确的是（）A．若受体大肠杆菌含有构建重组质粒时用到的限制性核酸内切酶，则一定有利于该重组质粒进入受体并保持结构稳定B．抗除草剂基因转入某抗盐植物获得2个稳定遗传转基因品系，抗性鉴定为抗除草剂抗盐和抗除草剂不抗盐。表明一定是抗盐性的改变与抗除草剂基因的转入无关C．抗除草剂基因转入某植物获得转基因植株，其DNA检测均含目...