小学、初中、高中各种试卷真题知识归纳文案合同PPT等免费下载www.doc985.com专题19基因工程与生物技术安全考点一基因工程的基本工具和基本操作程序【题型1】基因工程的基本工具【题型2】基因工程的基本操作程序【题型3】综合PCR的基因工程问题考点二基因工程的应用【题型1】基因工程的应用考点三蛋白质工程的原理和应用【题型1】蛋白质工程的原理和应用考点四DNA有关的实验【题型1】DNA的粗提取【题型2】DNA片段的扩增和电泳鉴定考点五生物技术的安全性与伦理问题【题型1】转基因生物的安全性【题型2】关注生殖性克隆人【题型3】禁止生物武器考点一基因工程的基本工具和基本操作程序01基因工程的基本工具【例1】用DNA重组技术可以赋予生物新的遗传特性，在此过程中需要使用多种工具酶，其中3种限制酶的切割位点如图所示。下列叙述错误的是（）A．限制酶和DNA连接酶作用的均是脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键B．EcoRI酶切割后的DNA片段可以用T4DNA连接酶连接C．EcoRV酶切割后的DNA片段可以用E．coliDNA连接酶连接D．经EcoRI酶和MunI酶切割后产生的两个DNA片段可进行连接【答案】C【分析】E.coliDNA连接酶只能连接黏性末端；T4DNA连接酶既可连接平末端，又可连接黏性末端。小学、初中、高中各种试卷真题知识归纳文案合同PPT等免费下载www.doc985.com【详解】A、限制酶能切开磷酸二酯键，DNA连接酶是催化DNA片段的连接，形成的是磷酸二酯键，A正确；B、EcoRI酶切割后的DNA片段为黏性末端，可用T4DNA连接酶连接，B正确；C、EcoRV切出的为平末端，应用T4DNA连接酶连接，C错误；D、经EcoRI酶和MunI酶切割后产生的末端相同，因此两个DNA片段可进行连接，D正确。故选C。【变式1-1】在DNA体外重组实验中，抗药性筛选法是一种常见的基因表达载体筛选方法，该方法实施的前提条件是载体DNA上携带特定的抗性基因。利用某外源DNA和pBR322质粒构建基因表达载体，然后导入大肠杆菌中，并进行筛选和鉴定，部分过程如图所示，其中AmpR表示氨苄青霉素抗性基因，TetR表示四环素抗性基因。已知PstI和BamHI切割DNA分子产生的末端不能互补。下列分析错误的是（）A．PstI和BamHI切割DNA分子产生的末端不能互补是因为两者的识别序列不同B．若使用PstI切割外源DNA片段，则切割pBR322质粒不能选择BamHIC．若菌落1的培养基中添加的是氨苄青霉素，则菌落1中的大肠杆菌未成功导入外源DNAD．若菌落2的大肠杆菌成功导入了外源DNA，则其能在含有四环素的培养基中生长繁殖小学、初中、高中各种试卷真题知识归纳文案合同PPT等免费下载www.doc985.com【答案】D【分析】基因工程的操作步骤：目的基因的获取；基因表达载体的构建；将目的基因导入受体细胞；目的基因的检测与鉴定。【详解】A、PstI和BamHI识别序列不同，产生的黏性末端不同，不能互补，A正确；B、如果用PstI切割外源DNA片段，则质粒也需要用到PstI切割，会破坏AmpR氨苄青霉素抗性基因，如果再选BamHI切割pBR322质粒，会把TetR四环素抗性基因也破坏了，导致构建好的基因表达载体上没有标记基因，B正确；C、据图判断菌落1是把目的基因插入氨苄青霉素抗性基因的位置，把氨苄青霉素抗性基因破坏了，所以菌落1中的大肠杆菌未成功导入外源DNA，才能在含有氨苄青霉素的培养基中生长，C正确；D、据图判断，目的基因插入了四环素抗性基因的位置，四环素抗性基因被破坏了，所以若菌落2的大肠杆菌成功导入了外源DNA，则其不能在含有四环素的培养基中生长繁殖，D错误。故选D。【变式1-2】在基因工程的操作中，需要三种工具，分别是“分子手术刀”、“分子缝合针”和“分子运输车”，关于这三种工具的叙述，正确的是（）A．“分子手术刀”指的是限制性内切核酸酶，可以断开DNA和RNA的磷酸二酯键B．“分子缝合针”指的是DNA聚合酶，可以催化生成断裂的磷酸二酯键C．“分子运输车”指的是载体，常用的载体有质粒、动植物病毒和噬菌体D．载体的化学本质一定是核酸【答案】C【分析】基因工程的工具：（1）限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂；（2）DNA连接酶：连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键；（3...