小学、初中、高中各种试卷真题知识归纳文案合同PPT等免费下载www.doc985.com小学、初中、高中各种试卷真题知识归纳文案合同PPT等免费下载www.doc985.com专题突破10综合PCR的基因工程问题课标要求阐述常规PCR、重叠延伸PCR、荧光定量PCR等的过程与原理，举例说明不同的PCR技术有着不同的应用。考情分析几种不同PCR的应用2023·江苏·T222023·山东·T252022·江苏·T242022·山东·T252021·全国甲·T382021·山东·T252020·北京·T122020·江苏·T33类型一利用PCR技术获取目的基因基本模型取目的基因是基因工程操作的第一步。取目的基因的方法有多，在常用获获种现PCR特异性地快速增目的基因。扩PCR是聚合酶式反的。是一根据链应缩写它项DNA半保留制的复原理，在体外提供参与DNA制的各分反件，目的基因的核酸序列行大复种组与应条对苷进量制的技。技由穆里斯等人于复术该术1985年明，此，穆里斯于发为1993年得了尔获诺贝化。学奖典例突破1．“X基因”是DNA分子上一个有遗传效应的片段，若要用PCR技术特异性地拷贝“X基因”，需在PCR反应中加入两种引物，两种引物及其与模板链的结合位置如图1所示。下列叙述错误的是()A．第一轮复制得到2个DNA分子，即①②各一个B．第二轮复制得到4个DNA分子，即①②③④各一个小学、初中、高中各种试卷真题知识归纳文案合同PPT等免费下载www.doc985.com小学、初中、高中各种试卷真题知识归纳文案合同PPT等免费下载www.doc985.comC．第四轮复制得到16个DNA分子，其中有4个X基因D．经五轮循环后产物中有五种不同的DNA分子答案C解析据分析可知，第一制形成图轮复2个DNA分子，即①②各一，个A正确；第二轮复制得到22＝4(个)DNA分子，即①制得复①和③、②制得复②和④，即得到①②③④各一个，B正确；第四制得到轮复16个DNA分子，其中有8个⑤(X基因)，C；五循后错误经轮环共形成32个DNA分子，其中①②各一，个③④各四，个22个⑤，故物中有五不同的产种DNA分子，D正确。类型二利用PCR技术鉴定目的基因的连接方式基本模型目的基因在受体胞是否定存在是基因工程操作的重要步，可以借助体上的检测细内稳骤载标基因、记PCR技和核酸分子交技等方法定受体胞中是否入了目的基因。在术杂术鉴细转实操作中，际PCR技不可以精准地定受体胞是否入目的基因，可以通引物的术仅鉴细转还过巧妙定目的基因的接方式。设计鉴连典例突破2．(2019·江，苏33节选)为鉴定筛选出的菌落中是否含有正确插入目的基因的重组质粒，拟设计引物进行PCR鉴定。图示为甲、乙、丙3条引物在正确重组质粒中的相应位置，PCR鉴定时应选择的一对引物是________。某学生尝试用图中另外一对引物从某一菌落的质粒中扩增出了400bp片段，原因是____________________。答案乙、丙目的基因反向连接解析分析可知，理上可以的引物合有甲和丙、乙和丙情。如果甲题图论选择组两种况选择和丙引物，无目的基因是否正确入，增的片段都是这对则论插扩50＋300＋100＝450(bp)，不符合要求；如果乙和丙引物，正向接和反向接后所得果不同，所以选择这对连连结应选择乙和丙引物行这对进PCR定。如果目的基因和粒反向接，引物乙出在重鉴质连则会现组质粒的外，此若加入引物甲和乙，可以增出侧时则扩300＋100＝400(bp)的片段。类型三利用PCR技术引导基因定点突变基本模型重延伸叠PCR技是指在术PCR技的基上，采用具有互末端的引物，使术础补PCR物形成产了重，通重的延伸，不同源的片段重接起的一新技。技在基叠链过叠链将来叠拼来项术该术小学、初中、高中各种试卷真题知识归纳文案合同PPT等免费下载www.doc985.com小学、初中、高中各种试卷真题知识归纳文案合同PPT等免费下载www.doc985.com因的定点突、片段基因的合成、基因敲除以及目的基因的增等方面有着特的用。变长扩独应典例突破3．水蛭素是一种蛋白质，可用于预防和治疗血栓。某科研团队运用重叠延伸PCR技术在水蛭素基因中的特定位点引入特定突变，使水蛭素第47位的天冬酰胺(密码子为AAC、AAU)替换为赖氨酸(密码子为AAA、AAG)，从而提高水蛭素的抗凝血活性。原理如图。注：中的引物图2和3的突起代表模板不能互的突位点。处与链补变(1)由以上事例可知，要对蛋白质...