小学、初中、高中各种试卷真题知识归纳文案合同PPT等免费下载www.doc985.com小学、初中、高中各种试卷真题知识归纳文案合同PPT等免费下载www.doc985.com第3章基因工程、第4章生物技术的安全性与伦理问题第1节重组DNA技术的基本工具[必备知识]1.基因工程是指按照人们的愿望,通过转基因等技术,赋予生物新的遗传特性,创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。从技术操作层面看,由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的,因此又叫作重组DNA技术。(P67)2.1944年,艾弗里等人通过肺炎链球菌的转化实验,不仅证明了遗传物质是DNA,还证明了DNA可以在同种生物的不同个体之间转移。(P68“科技探索之路”)3.切割DNA分子的工具是限制性内切核酸酶,简称限制酶,这类酶主要是从原核生物中分离纯化出来的。它们能够识别双链DNA分子的特定核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的磷酸二酯键断开,产生黏性末端或平末端两种形式的末端。(P71)4.DNA连接酶主要有两类,一类是E.coliDNA连接酶,另一类是T4DNA连接酶。后者既可以“缝合”双链DNA片段互补的黏性末端,又可以“缝合”双链DNA片段的平末端,但连接平末端的效率相对较低。(P72)5.质粒是一种裸露的、结构简单、独立于真核细胞细胞核或原核细胞拟核DNA之外,并具有自我复制能力的环状双链DNA分子。(P72)6.载体必须具备的条件:(1)能在受体细胞中保存下来并能自我复制;(2)具有一个或多个限制酶切割位点,以便与外源基因连接;(3)具有标记基因。(P72)7.在基因工程中使用的载体除质粒外,还有噬菌体、动植物病毒等。它们的来源不同,在大小、结构、复制方式以及可以插入外源DNA片段的大小上也有很大差别。(P73)8.DNA不溶于酒精,但某些蛋白质溶于酒精,利用这一原理,可以初步分离DNA与蛋白质。DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同,它能溶于2mol/L的NaCl溶液。在一定温度下,DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色,因此二苯胺试剂可以作为鉴定DNA的试剂。(P74“探究·实践”)[重要图解]1.限制酶切割DNA分子产生两种不同末端的示意图(箭头表示酶的切割位置)(P71)下图中的图1和图2分别表示的是EcoRⅠ限制酶和SmaⅠ限制酶的作用示意图,从图示可以看出,EcoRⅠ限制酶识别的碱基序列是GAATTC,切割位点在G和A之间;SmaⅠ限制酶识别的碱基序列是小学、初中、高中各种试卷真题知识归纳文案合同PPT等免费下载www.doc985.com小学、初中、高中各种试卷真题知识归纳文案合同PPT等免费下载www.doc985.comCCCGGG,切割位点在G和C之间。图1说明,EcoRⅠ发挥作用是在它识别序列的中心轴线两侧将DNA的两条链分别切开,所以产生的是黏性末端,图2说明SmaⅠ发挥作用是在它识别序列的中心轴线处将DNA的两条链分别切开,所以产生的是平末端。(P71“图3-3”改编)2.大肠杆菌及质粒结构模式图(P72)[易错提醒]错点1:误认为目的基因的插入位点是“随机”的精析:目的基因的插入位点不是随机的,基因表达需要启动子与终止子的调控,所以目的基因应插入启动子与终止子之间的部位,若目的基因插入启动子内部,启动子将失去原功能。错点2:误认为切取目的基因与切取载体时“只能”使用“同一种酶”精析:(1)在获取目的基因和切割载体时通常用同种限制酶,以获得相同的黏性末端。但如果用两种不同限制酶切割后形成的黏性末端相同时,在DNA连接酶的作用下目的基因与载体也可以连接起来。(2)为了防止载体或目的基因的黏性末端自己连接即所谓“环化”,可用不同的限制酶分别处理目的基因和载体,使目的基因两侧及载体上具有两个不同的黏性末端。小学、初中、高中各种试卷真题知识归纳文案合同PPT等免费下载www.doc985.com小学、初中、高中各种试卷真题知识归纳文案合同PPT等免费下载www.doc985.com第2节基因工程的基本操作程序[必备知识]1.培育转基因抗虫棉主要需要四个步骤:目的基因的筛选与获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。(P76)2.PCR是聚合酶链式反应的缩写。它是一项根据DNA半保留复制的原理,在体外提供参与DNA复制的各种组分与反应条件,对目的基因的核苷酸序列进行大量复制的技术。(P77)3.PCR反应...